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ATP及ATP荧光仪的相关介绍
1.什么是ATP?
      答:ATP(三磷酸腺苷)是一种作为活细胞主要能量来源的有机分子。动物、植物、细菌、酵母菌和霉菌细胞都能 产生并分解ATP以完成一系列的生物进程,包括肌肉收缩、光合作用和各种蛋白质的制造。
2.为什么用ATP作为有效清洁的指标?
      答:ATP存在于所有的有机物中,多数食品本身也都含有一定量的ATP,因此检测ATP可以作为判断是否洁净的指标。 Hygiena SystemSURE Plus、EnSURE、EnSURE Touch荧光仪与UltraSnap配合使用,采用生物发光技术检测残留的ATP以作为表面清洁度的指标。表面ATP的存在表明表面没有充分清洗,有滋生细菌的可能。残渣中也可能含有某些有害物质如潜在的过敏原等。
3.所有的食品中都含有ATP吗?
       答:大多数食品本身都含有一定量的ATP, 但食品的加工和烹饪过程会降低ATP的水平。
4.可以将RLU数和CFU计数进行对比吗?
      
答:Hygiena 荧光仪只能检测表面存在的总ATP,但它不能区分ATP是来自于微生物产生的亦或是因未充分清洗而残留在表面上的。 所以不能直接将ATP荧光仪测定的RLU读数与标准平板计数相对比。但是,ATP水平与微生物数目有着密切的相关性。Hygiena ATP荧光仪所 检测到的RLU 的值和ATP的多少是1:1的关系,即检测到的每1个femtomole 的ATP即显示为1个RLU值,如下表为2者的对比关系。
5.Hygiena ATP荧光仪工作原理?
      
答:Hygiena ATP荧光仪采用化学反应检测ATP,用UltraSnap ATP拭子采集标本。UltraSnap ATP拭子被缓冲液浸湿, 这样有助于从干燥或湿润的表面提取生物物质(ATP)。拭子也含有一种可以冲破生物膜的试剂,使其下可能存在的生物体暴露出来。标本采集后,拭子应浸泡 在能将细胞内ATP释放出来的溶剂中。而后细胞内部释放出的ATP、以及拭子从设备表面抹取的ATP再和UltraSnap独特的液体试剂一起反应。Ultrasnap的液体 试剂含有两种萤火虫酶---荧光素和荧光素酶,虫荧光素和虫荧光素酶在ATP存在的条件下会发光。发出的光可由SystemSURE Plus荧光仪进行检测。检测的发光量与ATP的总量成正比。数值越高,表明ATP的量越多,也就意味着表面的残留物越多。
6.数字表示什么?
      答:Hygiena ATP荧光仪以RLU(relative light unit即相对光单位的英文缩写)数值显示结果。在Ultrasnap拭子中发生的ATP反应所产生的光以光子的形式 发散出来。光子是微小的能量束,也是光的基本单位。SystemSURE对这些光子进行检测后直接以RLU数值的形式显示出来。Hygiena ATP荧光仪所检测的光子数量越多, RLU的数值就越大。这种线性比例使得人们很容易在洁净与不洁表面之间做出判断。 Hygiena ATP荧光仪检测的是总的ATP量,这些ATP来自细菌、酵母菌和霉菌体内以及食品加工设备表面的食物残渣中。所以RLU读数与微生物菌落形成单位(CFU) 并不相同。由于Hygiena ATP荧光仪荧光仪检测总量的ATP,它不能分辨其显示的RLU读数是微生物体内的ATP检测值还是残留物中的ATP检测值,或者是两者的结合。因此 不能在ATP/RLU数值和标准平板计数之间进行比较。在没有食物残渣存在的情况下微生物很容易被消毒剂杀死,所以如果设备表面不含ATP或ATP水平很低,表明没有 或很少有食物残渣存在,此时消毒剂的使用效果最好。
7.Hygiena ATP荧光仪和其它品牌的ATP荧光仪检测的RLU一样吗?
       答:尽管Hygiena 的ATP荧光仪和其它品牌的ATP荧光仪测量相同的对象(ATP),也都是以光度值的单位(RLU)显示出来。但是, 每种ATP荧光仪检测尺度是不一样的。 所有ATP系统都测量ATP的飞摩尔单位(1×10-15摩尔)。Hygiena ATP荧光仪的检测指标最为简单:1飞摩尔的ATP等于1RLU。也就是说, Hygiena是把所检测到的每1个飞摩尔的ATP转换成1RLU。而在另外一个品牌的ATP荧光仪检测系统上,1飞摩尔的 ATP 大约等于 10 RLU,也就是说,检测同样的飞摩尔含量的ATP, Hygiena的SystemSURE Plus可能检测出来的RLU值是1,该品牌的检测出来的RLU值就是10。
       举例来说,一根尺子的两边——一面以寸为单位,一面以厘米为单位,同样的长度,仪器可能会以厘米和寸两种形式来标识,但两者的长度实质上是相同的。在比较两个不同系统上 的相对光单位 (RLU) 时,同样的概念也适用。
8.拭抹什么样的区域?
       答:需要拭抹的主要是食品接触的区域和难以清洗的区域。食品接触区域包括食品直接和间接接触的表面。直接接触区域指那些 如有污染存在会直接污染产品的区域,因为进入这些区域后,不再有消毒灭菌等步骤。间接接触区域指有冷凝物溅出、或有可能有灰尘或液体滴落或进入产品的区域。 难清洗区域包括漏斗口、O环、管口以及表面不规则的区域、角落、沟槽和缝隙。
9.建议使用的限定值是多少,应如何确定自己的限定值?
      答: 仪器的初始设定指导,建议通过值< 10,警告值设置为11-29,不合格数值。 这些初始化设定数值由不同仪器、表面和日常使用的平板计数所决定。Hygiena建议您在设定自己的初始化数值时,应结合平板计数和ATP拭抹值,或使用以下提供的两种 “建议实施办法”中的一种。 在使用Hygiena为SystemSURE PlusTM提供的初始化设定时,读数小于10RLUs表明表面洁净;读数在11-29RLUs之间是警示表面没有彻底清洁;读数大于30RLUs表明表面很脏。 如果您没有参照这些指导数值,而且已经建立了自己公司的指导数值,那么我们建议您参照实行以下两点:
   (一)、建议实施办法
      1)确定控制点和关键控制点。
      2)清洁产品表面。
      3)在几个不同位置、连续几天进行ATP卫生监控检测以得出20-50个结果。计算这些RLU数值的平均值和标准偏差(s.d)。
      4)按以下方式设置限定值:
      5)Pass(通过) <= RLU平均值
      6)Caution (警告) >= RLU平均值 < 平均值 + 3 (s.d)
      7)Fail (不合格) >= RLU平均值 + 3 (s.d)
      8)Pass (通过) 0-10 RLU
      9)Caution (警告)11-29 RLU
      10) Fail (不合格) > 30 RLU
      11)定期重新计算以更新限定值,提高标准。
      (二)、可选择的程序
      1)确定质控点和关键质控点。
      2)彻底清洁产品表面,重复两到三次以到达最佳清洁度。
      3)在每个位置上进行ATP 卫生监控检测,重复检测5-10次。
      4)计算认为是通过标准的RLU平均数值。
      5)将通过标准增加2到3倍即为不合格值。
       警告值介于通过与不合格值之间。
10. hygiena ATP荧光仪与传统的微生物平板计数的比较
       ● 与平板计数的相关性为80-90%,但不会达到100%;
       ● 没有统计上的显著差异;
       ● ATP与CFUs间的相关性表明ATP的监控可对表面/机器是否达到运转所要求的洁净度做出快速判断;
       ●使用者一旦确定了与之采用的CFUs水平相对应的RLU起始数值,就无需在以后的工作中再进行大量的微生物检测;
       ● ATP检测可从根本上防止产品受到污染,减少了因产品不合格给厂商造成的损失。